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自考醫(yī)學(xué)專業(yè)論文

東北藜蒿提取物體外抗菌作用的初步研究論文

時(shí)間:2022-10-09 02:50:20 自考醫(yī)學(xué)專業(yè)論文 我要投稿
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東北藜蒿提取物體外抗菌作用的初步研究論文

  目的:研究東北藜蒿提取物的體外抗菌作用。方法:采用試管稀釋法測(cè)定東北藜蒿提取物水煎劑、醇提物對(duì)13種臨床常見(jiàn)病原菌的最低抑菌濃度(MIC),判定抗菌效果。結(jié)果:東北藜蒿水煎劑、醇提物對(duì)13種臨床常見(jiàn)病原菌均有不同程度的抗菌作用。結(jié)論:東北藜蒿提取物在體外有一定抗菌作用。

東北藜蒿提取物體外抗菌作用的初步研究論文

  【ABSTRACT】  Objective:To investigate the antibacterial function of Artemisia selengensis turcz extract in northeast china in vitro.Methods:The tube broth methods were used to determin the minimal inhibition concentration(MIC)for 13 common bacteria strains.Results:It was shown that Chinese Medicine in northeast china exerted different antibacterial effects on the 13 common bacteria strains.Conclusion:Artemisia selengensis Turcz.in northeast china holds antibacterial effects on common pathogens in vitro.

  【KEY WORDS】  Artemisia selengensis Turcz,The Minimal Inhibition Concentration,Microbial Sensitivity Tests

  藜蒿為菊科植物,又稱蔞蒿,在我國(guó)主要生長(zhǎng)在鄱陽(yáng)湖一帶,東北、華北和中南地區(qū)均有野生分布,含有豐富的人體必需的微量元素[1]。遠(yuǎn)在唐代,孫思邈就記載了藜蒿的藥用價(jià)值“藜蒿性平,味甘辛”,具有健體補(bǔ)虛、清心解毒、利膽退黃作用,主治肝膽濕熱、脾虛納滯等病癥。近年來(lái)研究表明藜蒿提取物具有降壓作用[2],也有少量報(bào)道其有不同程度抑菌作用[3]。為了開(kāi)發(fā)藜蒿的藥用資源,為臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù),我們對(duì)東北藜蒿的體外抗菌作用進(jìn)行了初步研究。

  1  材料與方法

  1.1  一般資料

  1.1.1  藥材  干燥藜蒿原植物產(chǎn)于東北。

  1.1.2  菌種  乙型副傷寒沙門菌,銅綠假單胞菌,大腸埃希菌,表皮葡萄球菌,痢疾志賀菌,鮑曼不動(dòng)桿菌,嗜麥芽假單胞菌,肺炎克雷伯氏菌,金黃色葡萄球菌,變形桿菌,而莖平滑念珠菌,熱帶念珠菌,白色念珠菌,均購(gòu)自北京生物制品檢定所。

  1.1.3  培養(yǎng)基

  1.1.3.1  液體培養(yǎng)基  Mueller-Hinton(MH)肉湯。

  1.1.3.2  固體培養(yǎng)基  Mueller-Hinton(MH)瓊脂,沙氏培養(yǎng)基。

  1.1.4  儀器  721分光光度計(jì),培養(yǎng)箱,無(wú)菌超凈工作臺(tái)。

  1.2  方法

  1.2.1  藜蒿水煎劑的制備  中藥煎制:參照陳奇的方法[4]進(jìn)行,取藜蒿粉碎,加蒸餾水浸泡30min后加熱煮沸。開(kāi)始用強(qiáng)火,沸騰后改用文火,保持微沸30min至1h,攪拌、趁熱過(guò)濾。藥渣再加蒸餾水煮沸30min,濾過(guò)。合并濾液,濃縮成含生藥2g/mL的藥液,滅菌后備用。

  1.2.2  藜蒿醇提物的制備  參照陳奇的方法[4]進(jìn)行,用60%乙醇提取,濃縮成含生藥2g/mL的藥液,滅菌后備用。

  1.2.3  菌液的制備

  1.2.3.1  標(biāo)準(zhǔn)比濁管配制  0.048mol/L(1.175%)氯化鋇0.5mL,加0.18mol/L(1%)硫酸溶液99.5mL,混勻后用530nm波長(zhǎng)比色調(diào)整其濁度,使吸收值為0.1。相當(dāng)于5×(107~108CFU/mL)。其操作參考醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[5]。

  1.2.3.2  實(shí)驗(yàn)菌液制備  將實(shí)驗(yàn)所用13種菌的培養(yǎng)物(菌落)用無(wú)菌生理鹽水制成菌液,濃度相當(dāng)于0.5麥?zhǔn)媳葷帷?/p>

  1.2.4  藜蒿提取物(藥液)的稀釋  藜蒿提取物采用試管稀釋法[4],每一組實(shí)驗(yàn)取試管5支,分別標(biāo)記1、2、3、4、5,共13組,用MH肉湯(細(xì)菌)、沙氏液體(真菌)倍比稀釋藥液至待測(cè)的濃度,依次為1.5g/mL、1.0g/mL、0.5g/mL、0.25g/mL、0.125g/mL。另取3 支試管作為對(duì)照管,分別標(biāo)記為“MH 肉湯對(duì)照”,“藥物原濃度對(duì)照”,“測(cè)試菌生長(zhǎng)對(duì)照”。

  1.2.5  實(shí)驗(yàn)方法  藥液稀釋好之后將13種實(shí)驗(yàn)菌液分別加入13組含藥液培養(yǎng)基的試管中,除MH肉湯對(duì)照管外每管0.1mL菌液。所有試管放置溫箱內(nèi)37℃,培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果,在對(duì)照管符合要求的情況下,將各實(shí)驗(yàn)管的培養(yǎng)物接種至相應(yīng)培養(yǎng)基的瓊脂平板上,確定是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。37℃,24h觀察結(jié)果,以瓊脂平板上完全無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物最高稀釋度為最低抑菌濃度(MIC)。

  2 結(jié)果

  2.1  東北藜蒿水煎劑對(duì)13種病原菌的最低抑菌濃度(MIC)見(jiàn)表1。表1  東北藜蒿水煎劑對(duì)13種病原菌的最低抑菌濃度注:有病原菌生長(zhǎng) “+” 無(wú)病原菌生長(zhǎng)“-”

  結(jié)果顯示:東北藜蒿水煎劑對(duì)細(xì)菌和真菌均有不同程度的抑菌作用,對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌抑菌作用較強(qiáng),MIC為0.25g/mL。對(duì)真菌中熱帶念珠菌抑菌效果較好,MIC為1.0g/mL,重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

  2.2  東北藜蒿醇提物對(duì)13種病原菌的最低抑菌濃度見(jiàn)表2。表3  東北藜蒿醇提物對(duì)13種病原菌的最低抑菌濃度結(jié)果顯示:東北藜蒿醇提物對(duì)表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌抑菌作用很強(qiáng),MIC為0.125g/mL。對(duì)真菌中近平滑念珠菌有較強(qiáng)抑菌效果,MIC為0.25g/mL。

  3 討論

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明東北藜蒿水煎劑及醇提物均有體外抗菌作用。與已報(bào)道的藜蒿水煎劑對(duì)大腸桿菌,金黃色葡萄球菌,痢疾桿菌的MIC值[4]不完全相同,與我們實(shí)驗(yàn)的其它藜蒿MIC值也不同,可能因?yàn)樗幉漠a(chǎn)地不同導(dǎo)致藥材化學(xué)成分含量不一致,以致抗菌效果也不同。

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明東北藜蒿水煎劑及醇提物對(duì)13種病原菌抑菌作用不完全相同。水煎劑對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌和熱帶念珠菌抑菌效果較好,醇提物對(duì)表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌、近平滑念珠菌的抑菌作用較強(qiáng)。在臨床上真菌感染及其治療越來(lái)越受到關(guān)注,中藥抗真菌研究及治療倍受關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)表明東北藜蒿醇提物對(duì)近平滑念珠菌有一定抑制作用,MIC為0.25g/mL,藜蒿抗念珠菌感染有潛在開(kāi)發(fā)價(jià)值。東北藜蒿醇提物對(duì)表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌的MIC為0.125g/mL,是否可用于臨床抗感染治療有待于進(jìn)一步研究。

  本實(shí)驗(yàn)在體外進(jìn)行,在體內(nèi)能否達(dá)到有效抗菌濃度,控制感染,有待繼續(xù)探討,還有必要對(duì)東北藜蒿水煎劑、醇提物的抗菌成分及機(jī)理作進(jìn)一步研究,為開(kāi)發(fā)和綜合利用該資源提供科學(xué)依據(jù)。

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